کاهش بیان ژنهای Tie1 و VCAM-1 در شرایط بیوزوی: استراتژی جدید برای مطالعه و درمان بیماری تصلبشرائیه

Transcript

1 Journal of Shahid Sadoughi University of Medical Sciences Vol. 24, No.7, Oct 2016 Pages: هجله علوي پصوهطي دانطگاه علوم پسضكي ضهيد صدوقي يسد دوره 24 ضواره 7 ههر 9315 صفحه: چكيده کاهش بیان ژنهای و در شرایط بیوزوی: استراتژی جدید برای مطالعه و درمان بیماری تصلبشرائیه هقدهه: 2* 9 هوا دادگرنيا زهرا حاج ابراهيوي ث تشتیت اص ه لى ل ب سػپت س بی ػل ل بی ا ذتلیبلی ؼت ذ و هیت ا ذ دس ثیوبسی تللت ؿشائیي )آتشاػىلشصیغ( مؾ داؿت ثبؿ ذ. ػل ل بی ا ذتلیبل ث یش بی هىب یىی اصخول خبرث حؼبع ؼت ذ دس ایي ساػتب هغبلؼبت حبوی اص تغییش ؿىل ػولىشد آى ب دس ؿشایظ ثیص ی اػت. ث ه ظ س ثشسػی تأثیش ثیص ی ثش تللت ؿشائیي ثیبى طى دس ؿشایظ ؿجی ػبصی ؿذ ثیص ی ثش سی ػل ل روش بررسي: ا ذتلیبل سیذ ث ذ بف ا ؼبى ه سد هغبلؼ لشاس گشفت سؽ هغبلؼ اص ع تدشثی ث د. دس ایي هغبلؼ اثتذا ػل ل بی ا ذتلیبل سیذ ث ذ بف ا ؼبى اص ثب ه ػل لی پبػت س خشیذاسی ؿذ. ػل ل ب ثشای هذت ػبػت دس ؿشایظ ثیص ی ثب اػتفبد اص دػتگب ؿجی ػبص ثیص ی ولی اػتت لشاس گشفت ذ. اص ػل ل نتايج: هزو س اػتخشاج RNA ك ست گشفت تغییشات ثیبى طى ب ثب تى یه Real-time PCR ثشسػی گشدیذ. تبیح بى داد و ثیص ی ث ع س لبثل ت خ ی ه دش ث وب ؾ هیضاى ثیبى طى دس و همبیؼ ثب و بی و تشل هیؿذ) p<0/05 ( ث ع سی و پغ اص 3 سص اػوبل ثیص ی ثیبى ایي د طى ثؼیبس وب ؾ هییبفت. نتيجهگيری: ثیص ی دس ث ظش هیسػذ و ثیص ی داسای تأثیش هثجت دس وب ؾ فبوت س بی ایدبد و ذ تللت ؿشائیي اػت هیت ا ذ ث ػ اى یه اػتشاتظی خذیذ دس دسهبى ثیوبسی تللت ؿشائیي ه سد اػتفبد لشاس گیشد. وچ یي اص ثیص ی هیت اى ثشای هغبلؼ س ذ ایدبد پیشفت ثیوبسی ػشلی یض ث ش ثشد. واشههای کليدی: ثیص ی تللت ؿشائیي ػل ل ا ذتلیبل سیذ ث ذ بف ا ؼبى 1- دانشجوی کبرشنبسی ارشد ژنتیک گزوه سیستشنبسی دانشکده علوم پبیه دانشگبه آساد اسالمی واحد دامغبن دامغبن 2- استبدیبر پژوهشگبه هوافضب وسارت علوم تحقیقبت و فنبوری تهزان * )نویسنده مسئول( تلفن: پست الکتزونیکی: hajebrahimi@ari.ac.ir تبریخ دریبفت: 1394/11/5 تبریخ پذیزش: 1395/6/20

2 556 کاهص بياى شىهای و در ضرايط بيوزني: هقدهه تحمیمبت اخیش بى داد اػت و الت بة مؾ ولیذی دس حبلت بی هختلف ثیوبسی تللت ؿشائیي ایفب هیو ذ. یىی اص الیي پبػخ بی ػل لی لبثل تخیق دس ایدبد ضبیؼبت آتشاػىلشص چؼجیذى لى ػیت ب ث ا ذتلی م دی اس ػشق دس مبط آ بت هیه خبف اػت. لى ػیت ب ا ذتلی م ث هب ذ دیگش پبػخ بی الت بثی اص ػذ ا ذتلی م ػج س وشد دس ه بعمی دس صیش خبیی و چشث ه ػیت ب ػل ل بی ف م هب ذ ایدبد ؿذ اػت تدوغ سا هلشف وشد هییبث ذ. ثب ایي خ د تللت ؿشائیي یه ع خبف اص پبػخ بی الت بثی اػت و دس آى فشاخ ا ذ ؿذى لى ػیت ب دس ه بعك هؼتؼذ ضبیؼ دس اتفبق ؿشیبى ب هیافتذ و تید آى تدوغ ل ف ػیت ب ه ػیت ب)ث خضء گشا ل ػیت ب( دس صیش ا ذتلی م اػت. ایي فشاخ ا ذ ؿذى لى ػیت ب ث دلیل ثیبى ه لى ل بی هخل ف چؼج ذگی لى ػیت ب ت ػظ ػل ل بی ا ذتلی م اػت) 1-6 (. هغبلؼبت اخیش حبوی اص ایي اػت و ه بخشت لى ػیت ب حذالل ث اػغ ػ هؼیش ػیگ بلی E-selectins endothelial P ت ػظ ػل ل بی ا ذتلیبل ثیبى )7( ثب ه لى ل هیؿ د اػت. دس هشحل ال او ؾ و هید ذ )8-11(. ث د جبل آى لبیؼی فؼبل هیؿ ذ و ه دش ث افضایؾ چؼج ذگی هت لف ؿذى ثیتش ػل ل ب هیؿ د. وو ویي تشؿحی اص ثبفت ب یب آى بیی و دس ػغح ا ذتلی م ؼت ذ ه خت ا تمبل ػیگ بل بیی ای تگشیي ب هیؿ ذ و ه خت فؼبل ؿذى چؼج ذگی هیگشدد. اػضبی اثشخب اد ایو گل ث لیي ب ه لى ل بی چؼج ذگی ا ذتلی م ؿبهل ICAM-1 هیب دیگش بی چؼج ذگی ؼت ذ. دس آخشیي هشحل وو تبوؼی )12 13(. ه لى ل ؿجی یىذیگش ؼت ذ. ه بخشت اص ا ذتلی م ث ثبفت ب ICAM-1 لی ثیبى ه بعك داسای ضبیؼ اػت دسحبلی و هید ذ سی اص ظش ػبختبس خیلی ICAM-1 خبسج اص ضبیؼ یض ثیبى هیؿ د) (. ه لى ل ثیتش هحذد ث دس هحل سػپت س تبیشصیي وی بصی اػت و دس ػل ل بی ا ذتلیبل ثیبى هیؿ د دس ثیوبسی الت بثی مؾ داسد. هغبلؼبت بى داد اػت و دس ثیوبسیی چ ى تللت ؿشائیي آستشیت سهبت ئیذ ثیبى آى افضایؾ هییبثذ) 16 (. هغبلؼبت اخیش بى داد اػت و افضایؾ ثیبى آصهبیگب هیؿ د) 17 (. دس ػل ل بی ا ذتلیبل ا ؼب ی دس هحیظ ه دش ث فؼفشیالػی ى پبػخ بی الت بثی ػل ل بی ا ذتلیبل ػشق یه الی بصن دس ػغح داخلی ػشق سا تىیل هید ذ مؾ ه وی دس حفظ و ػتبصی ػشق و چه ت ظین خشیبى خ ى دیگش فشای ذ بی فیضی ل طیه ػیؼتن للجی ػشلی ایفب هیو ذ. هغبلؼبت بى داد اػت و ػل ل بی ا ذتلیبل ث هحشن بی ثی ؿیویبیی پبػخ هید ذ ثیبى طى ب دس آى ب تغییش هیو ذ) ( و ایي اهش هیت ا ذ دس ف ن هىب یؼن بی و ػتبصی ػشق ث هب ووه و ذ. یىی اص یش بی فیضیىی و ثش سی ػولىشد ػل ل ب تأثیش هیگزاسد خبرث اػت تغییشات فیضی ل طیىی دس فضب سداى دس ع ل ػفش بی فضبیی گ ا ی ثش ایي هغلت اػت) 20 (. ػل ل بی ا ذتلیبل ثؼیبس تشطى ؼت ذ سفتبس بی هتفبتی اص ایي ػل ل ب ث گبم وت دس ؿشایظ ثیص ی هب ذ ؿذ اػت) 21 (. یىی اص یش بی هحیغی و دس ع ل حیبت دس تىبهل ه خ دات ص ذ هؤثش فیضی ل طیىی و فضب سداى ث د اػت خبرث اػت. تغییشات دس ع ل ػفش بی فضبیی تدشث هیو ذ ث خ ثی ثیب گش مؾ یشی خبرث دس تىبهل ه خ دات ص ذ اػت. هغبلؼ ػل ل ب دس ؿشایظ ثیص ی ن هیت ا ذ ث هب دس ف ن حل هىالت فضب سداى ووه و ذ ن هیت ا ذ ثبػث افضایؾ ػلن صیؼتؿ بػی گشدد) (. اص آ دب و خبرث هتغیشی اػت و دس ع ل حیبت ثش اسگب یؼن بی ص ذ اػوبل ؿذ اػت حزف آى هیت ا ذ ه دش ث سؿي ؿذى ثؼیبسی اص ػؤاالت ػلن صیؼتؿ بػی حتی ث ج د ویفیت ص ذگی ثش ثش سی صهیي گشدد. ث ع س هثبل سؿذ ػ ثؼذی ػل ل ب دس ؿشایظ ثیص ی دس ه ذػی ثبفت اسگبى ثذى یبص ث داسثؼت ه ن اػت یب هغبلؼ پ وی اػتخ اى دس فضب سداى دس ت لیذ داس بی خذیذ ثشای هىالت پ وی اػتخ اى دس افشاد اػت) (. هیبىػبل هؤثش ث د

3 557 هوا دادگرنيا و هوكارش ؿشایظ ثیص ی سا هیت اى ثب پشاص بی فضبیی یب ػم ط آصاد ایدبد وشد. ث دلیل هحذدیت دس ػفش بی فضبیی و تب ث دى ع ل ثیص ی ایدبد ؿذ دس ػم ط آصاد سؽ بیی ثشای ؿجی ػبصی ؿشایظ ثیص ی ثش سی صهیي ت ػؼ یبفت اػت و اص ثیي آى ب دػتگب ولی اػتت ته هح س ػیل هفیذی ثشای ؿجی ػبصی ثیص ی ثش سی ػل ل ب اػت) (. یىی اص ا اع ػل ل بی ا ذتلیبلی ػل ل ا ذتلیبلی سیذ ث ذ بف ا ؼبى اػت. ذف اص هغبلؼ حبضش ثشسػی ثیص ی ؿجی ػبصی ؿذ ثش ثیبى طى بی تأثیش ؿشایظ دس ػل ل بی ا ذتلیبل سیذ ث ذ بف ا ؼبى) HUVEC ( اػت. اص آ دب و ػل ل بی ا ذتلیبل مؾ ه ن ولیذی دس گ ذاسی یىپبسچگی ػشق سيصایی ایفب هیو ذ هغبلؼ آى ب دس ؿشایظ ثیص ی ن هیت ا ذ ثشخی اص هىالت للجی- ػشلی فضب سداى سا ت ضیح د ذ ن دس هغبلؼ سؿي ؿذى هىب یؼن بی ایدبد هىالت ػشلی چ ى تللت ؿشائیي یبفتي سؽ بی دسهب ی ثشای آى ب ث هب ووه و ذ. وچ یي هیت اى اص ثیص ی ثشای ت لیذ ػشق خ ی خ ت ػل ل دسهب ی ثیوبسی ایؼىویه تللت ؿشائیي اػتفبد و د) (. روش بررسي وت ػل ل بی ا ذتلیبل سیذ ث ذ بف ا ؼبى ایي هغبلؼ اص ع تدشثی ث د. ػل ل بی ا ذتلیبل سیذ ث ذ بف ا ؼبى اص ثب ه ػل لی ا ؼتیت پبػت س ایشاى خشیذاسی ؿذ دس هحیظ وت ویت دس فالػه ه بػت دس ا ى ثبت س ثب دهبی )Clonetics, USA( EGM-2-MV Bullet 37 دسخ ػب تیگشاد 5 CO2 گبص %5 دس سع ثت ه بػت تىثیش ؿذ ذ. ایي ویت ؿبهل هحیظ پبی ا ذتلیبل) medium )Endothelial basal ػشم خ یي گ ػبل فبوت س سؿذ اپیذسهی ا ؼب ی factor( human epidermal growth )hegf فبوت س سؿذ پبی ا ؼب ی تشویت) recombinant human growth factor-basic )hfgf-b فبوت س سؿذ اپیذسهبل ػشق) vascular epidermal growth factor )VEGF فبوت س سؿذ ؿج ا ؼ لیي 1 1( insulin-like growth factor پبسیي یذسو ستیضل آ تیثی تیه )IGF-1 اػیذ آػى سثیه ث د. هحیظ GA-1000 وت سص ثؼذ اص چؼجیذى ػل ل ب ثؼذ اص آى ث ك ست یه سص دسهیبى تؼ یض هیؿذ. ػل ل ب ثؼذ اص پبػبط 3 دس هغبلؼ اسد ؿذ ذ. ثبفش HEPES وت اضبف ؿذ تب اص تغییشات خل گیشی ؿ د. و ب دس غلظت 1/2 %)حدوی/حدوی( ث هحیظ ph ث د گش و تشل ؿذ ذ. و بی و تشل دس ؿشایظ و ث ػلت ووج د گبص ثیص ی CO2 1 تمؼین خی وت ؿذ ذ ثیص ی ثشای هذت صهبى د ػبػت 24 ػبػت 72 ػبػت دس ؿشایظ ثیص ی ثش سی دػتگب ولی اػتت ته هح س و اص دفتش ػبصهبى هلل هتحذ دس اه س فضبی خبسج اص خ United Nations Office at Vienna; The Office for Outer ( )Space Affairs گشفت ؿذ لشاسگشفت. ؿىل دػتگب 1 ولی اػتت ته هح س سا بى هید ذ. ػشػت دػتگب دس 20rpm ت ظین ؿذ هیضاى ثیص ی 0/001 خی ث د. دػتگب دس ا ى ثبت س لشاس گشفت و بی و تشل یض نصهبى ثب و ثیص ی دس ا ى ثبت س لشاس گشفت ذ. پغ اص هذت صهبى ه بػت ػل ل ب تشیپؼی خوغآسی ؿذ ذ تب دس هشاحل ثؼذ اص آى ب RNA اػتخشاج گشدد. ؿىل 1: ولی اػتت ته هح س اػتخشاج RNA ػبخت cdna ثشای ثشسػی طى بی ه سد ظش ثب RT-PCR اثتذا ؿذ پغ اص )Total تبم) RNA RNA حل ل اعوی بى اص ویفیت ؿذ او ؾ س یؼی هؼى ع ا دبم ث ػ اى و اػتفبد اص تى یه اص ػل ل ب اػتخشاج RNA cdna DNA اػتفبد لشاس گشفت. اػتخشاج الگ ثشای ا دبم او ؾ اػتخشاج ت لیذ ؿذ PCR RNA TRIZOL(Invitrogen, USA.) گشفت. ك ست خل ف همذاس ه سد تبم اص ػل ل ب ت ػظ هحل ل هغبثك ثب دػت سوبس ؿشوت ػبص ذ ت ػظ ؿذ اػتخشاج RNA

4 558 کاهص بياى شىهای و در ضرايط بيوزني: الىتشف سص طل آگبسص خزة سی دس ب هتش ك ست هیىشگشم اص 2 ػپغ گشفت. RNA )TAKARA, JApan(RNase-free DNase شگ آل دگی ثب اص ویت cdna DNAی ط هی اػتخشاج ؿذ ثب آ ضین ث ه ظ س حزف تیوبس ؿذ خ ت ػ تض PrimeScriptTM 1st strand cdna Synthesis )TAKARA, JApan( اص ػ تض طى GAPDH اػتفبد ؿذ. اػتفبد ؿذ. خ ت اسصیبثی ػ تض cdna ثشسػی ثیبى طى بی ه سد ظش دس ػل ل بی ا ذتلیبل سیذ ث ذ بف ا ؼبى ثب اػتفبد اص تى یه Real-time PCR خ ت تىثیش طى ب او ؾ Real time PCR )1 ثب اػتفبد اص 2 هیىشلیتش اص هحل ل cdna پشایوش بی هخل ف ش طى )خذل دػتگب SYBR Premix Ex Taq II (TAKARA, Japan) (Corbett, Australia) Rotor Gene 6000 Real Time PCR ؿذ. خ ت عشاحی پشایوش بی طى ا دبم وچ یي طى GAPDH نام شى ث ػ اى و تشل دس ی اص شمافضاس سطى USA)3/5 (Hastings Software, New York, Gene Runner اػتفبد ؿذ ت ػظ ووپب ی )CopenhagenA/S, Denmark(TAG ثب خل ف ثبال ػبخت ؿذ. ث ه ظ س خل گیشی اص تىثیش DNA ثشای ش طى حذالل یىی اص د پشایوش دس هحل اتلبل اگضى- اگضى عشاحی ؿذ. ثشای اعوی بى اص اختلبكیت هحل الت پشایوش بی عشاحی ؿذ ثب ط م ا ؼبى PCR توبهی blast PCR ؿذ هحل الت ت ػظ سؽ ضن آ ضیوی ثب آ ضین بی هحذد و ذ تبییذ ؿذ ذ. ؿشایظ دهبیی ه سد اػتفبد ؿبهل یه هشحل فؼبلػبصی الی دس دهبی 95 دسخ ػب تیگشاد ث هذت 30 ثب ی دس اداه 40 ػیىل ث ك ست 5 ثب ی دس 95 دسخ ػب تیگشاد ثشای د بت ساػی ى 30 ثب ی دس 60 دسخ ػب تیگشاد ثشای annealing/extension ضواره RefSeq نصهبى ث د. ث ه ظ س ثشسػی اختلبكیت هحل ل تىثیش ؿذ ه ح ی رة هغبلؼ ؿذ. هیضاى ثیبى طى ثب سؽ ووی ؼجی -ΔΔCT 2 اسصیبثی گشدیذ. تؼییي ΔΔCT اػتفبد اص فشه ل خذل 1: تشادف ػبیش هخلبت پشایوش بی ث وبس گشفت ؿذ دس ایي هغبلؼ توالي پرايور) 5 به 3 ( طول هحصول (bp) PCR Forward: TGTCAATGTTGCCCCCAGAG Reverse: CACAGGATTTTCGGAGCAGGA Forward: GGAGACAAGCACCATCATCCG Reverse: CTACTGTGTTGCTCCAGTCCC Forward: AACAGCCTCAAGATCATCAGCA Reverse: GATGGCATGGACTGTGGTCAT M BC BT GAPDH سطى تدضی تحلیل آهبسی توبم آصه ى بی آهبسی ثب اػتفبد اص شمافضاس آهبسی SPSS )SPSS Inc. Chicago, USA(13 ا دبم ؿذ. تدضی تحلیل یبفت بی حبكل اص ػ دؾ بی ووی) Real-time ( هیضاى ثیبى طى ب دس و بی ثیص ی و تشل ثب اػتفبد اص شمافضاس )Representational State Transfer( REST 2008 )Corbett research Pty Ltd, Australia( ا دبم ؿذ. اختالف آهبسی ثیي گش بی و تشل ثیص ی ثب اػتفبد اص تؼت Mann-Whitney ثشسػی ؿذ. ولی آصهبیؾ ب 3 ثبس تىشاس ؿذ همذاس 0/05>P ث ػ اى هؼیبس هؼ یداسی دس توبم تؼت ب دس ظش گشفت ؿذ. نتايج وبىگ و دس ثخؾ ه اد سؽ ب گفت ؿذ ػل ل بی ا ذتلیبل سیذ ث ذ بف ا ؼب ی اص ثب ه ػل لی ا ؼتیت پبػت س ایشاى خشیذاسی ؿذ. دس هحیظ EGM2 دس ؿشایظ وبهال اػتشیل وت تىثیش ؿذ ذ. ؿىل 2 تل یش ایي ػل ل ب سا ثؼذ اص پبػبط ػ م بى هید ذ.

5 559 هوا دادگرنيا و هوكارش ؿىل 2: ػل ل بی ا ذتلیبل سیذ ث ذ بف ا ؼبى ثؼذ اص پبػبط ػ م ثیبى طى بی ه سد هغبلؼ ت ػظ تى یه Real-time PCR ث سؽ ػبیجشگشیي ا دبم ؿذ. ثشای توبهی ن ب طى GAPDH ث ػ اى و تشل داخلی ه سد اػتفبد لشاس گشفت ػؼی ؿذ او ؾ PCR و ب ا دبم گیشد. و داس 1 تحت ؿشایظ وبهال یىؼبى ثشای توبم هیضاى ثیبى طى CD106 صهبى بی وبىگ 2 یب سا دس و بی و تشل و بی ثیص ی دس ػبػت ػبػت و دس و داس هخق اػت ػبػت بى هید ذ. هیضاى ثیبى طى دس ؿشایظ ثیص ی ثؼذ اص 2 ػبػت ث حذد لف هیضاى ثیبى آى دس و بی و تشل 1 وب ؾ اداه داؿت ث ع سی و ثؼذ اص خی 1 سػیذ. ایي س ذ گشفتي سص لشاس ػل ل ب دس ثیص ی هیضاى ثیبى ایي طى ضدیه ث كفش ؿذ تب 72 ػبػت ثیبى آى ضدیه ث كفش ثبلی هب ذ) P 0/05 (. و داس 1: ؿذت ثیبى ؼجی طى دس ػل ل بی ا ذتلیبل سیذ ث ذ بف ا ؼبى لجل اص ثیص ی )ػت ى ال (1G ثؼذ اص آى دس صهبى بی 2 ػبػت )ػت ى دم )2hM 24 ػبػت )ػت ى ػ م )24hM 72 ػبػت )ػت ى چ بسم )72hM ثیص ی و داس 2 تغییشات ثیبى طى سا دس ػل ل ا ذتلیبل سیذ ث ذ بف ا ؼبى دس ؿشایظ و تشل 1 خی ثیص ی بى هید ذ. تغییشات ثیب ی ایي طى یض هبث ثب ثیبى ث د ثیص ی ه دش ث وب ؾ لبثل هالحظ ای دس ثیبى آى گشدیذ. وبىع س و هب ذ هیؿ د ثی هیضاى ثیبى ایي طى دس ؿشایظ ػبػت 2 ثؼذ اص ثیص ی ث حذد لف هیضاى ثیبى آى دس و بی و تشل 1 خی سػیذ. ایي س ذ وب ؾ اداه داؿت ث ع سی و ثؼذ اص 1 سص لشاس گشفتي ػل ل ب دس ثیص ی هیضاى ثیبى ایي طى ضدیه ث كفش ؿذ تب 72 ػبػت ثیبى آى ضدیه ث كفش ثبلی هب ذ) P 0/05 (. و داس 2: ؿذت ثیبى ؼجی طى دس ػل ل )24hM 72 ػبػت )ػت ى چ بسم )72hM ثیص ی ا ذتلیبل سیذ ث ذ بف ا ؼبى ثؼذ اص آى دس صهبى بی 2 ػبػت )ػت ى دم )2hM 24 ػبػت )ػت ى ػ م

6 ( ( 560 کاهص بياى شىهای و در ضرايط بيوزني: بحث یىی اص ا اع ػل ل بی ا ذتلیبلی ػل ل ا ذتلیبلی سیذ ث ذ بف ا ؼبى اػت. دس هغبلؼ حبضش هب ث تأثیش ؿشایظ ثیص ی ثشای هذت 2 ػبػت 24 ػبػت 72 ػبػت ثش سی ثیبى د طى پشداختین. ثشای ایدبد ؿشایظ ثیص ی اص دػتگب ولی اػتت ته هح س و اص دفتش ػبصهبى هلل هتحذ دس اه س فضبی خبسج اص خ گشفت ؿذ ث د اػتفبد وشدین. وبىع س و گفت ؿذ ثیبى طى دس ػل ل بی ا ذتلیبل سیذ ث ذ بف ا ؼبى پغ اص 24 ػبػت لشاسگیشی دس ؿشایظ ؿجی ػبصی ثیص ی دس دػتگب ولی اػتت دس حذد %50 دس همبیؼ ثب و بی و تشل وب ؾ یبفت. ایي وب ؾ ثیبى تب سص ػ م اداه داؿت ث گ ای و دس سص ػ م ثیص ی هیضاى ثیبى ایي طى دس همبیؼ ثب و بی و تشل ضدیه ث كفش سػیذ. هغبلؼبت لجلی حبوی اص ایي اػت و افضایؾ ثیبى طى دس ؿشع ثیوبسی تللت ؿشائیي فشاخ ا ذ ؿذى لى ػیت ب ث هحل ضبیؼ تأثیش هثجت داسد. دس ػبل 1998 Nakashima وىبساى بى داد ذ و ثیبى طى دس هحل بی ضبیؼ دس ػشق ه ؽ افضایؾ هییبثذ ایي افضایؾ ثیبى ه دش ث پیشفت ضبیؼ هیگشدد. ث گ ای و افضایؾ ثیبى ایي پشتئیي ه دش ث فشاخ ا ذ ؿذى ه ػیت ب ث هحل ضبیؼ پیشفت ثیوبسی هیگشدد) 28 (. مؾ دس ؿشع ثیوبسی تللت ؿشائیي ت ػظ هغبلؼبت دیگش یض گضاسؽ ؿذ اػت) 29 (. آ تیثبدی ه ول بل ػلی اػتفبد اص ایي پشتئیي ه دش ث وب ؾ ه ػیت ب دس هحل ضبیؼ دس تید وب ؾ اثشات ثیوبسی ؿذ و ایي خ د تبویذی ثش مؾ ایي ه لى ل دس ثیوبسی تللت ؿشائیي داسد) (. طى هغبلؼ هب وچ یي بى داد و ثیص ی ه دش ث وب ؾ ثیبى هیگشدد. هبث ثب ثیبى ایي طى پغ اص 24 ػبػت ث حذد لف وب ؾ هییبفت و ایي وب ؾ تب سص ػ م اداه داؿت ث ضدیه كفش دس همبیؼ ثب و بی و تشل هیسػیذ. ه لى ل سػپت س تبیشصیي وی بصی هخل ف ػل ل بی ا ذتلیبل اػت و دس افضایؾ ثیبى ه لى ل ICAM-1 E-selectin مؾ ولیذی داسد. شػ ایي ه لى ل ب اص هیب دیگش بی ایدبد تللت ؿشائیي ؼت ذ و دس ؿشع ثیوبسی پیشفت آى هؤثش ؼت ذ) 7-11 وب ؾ ثیبى طى ث بثشایي هیت ا ذ هب غ اص ایدبد ػختی ػشق گشدد. دس ه سد ایي ه لى ل یض بى داد ؿذ اػت و ثیبى آى دس ثیوبسی تللت ؿشائیي افضایؾ هییبثذ) 16 (. دس ػبل 2009 Sukhatme Chan بى داد ذ و ه بس ثیبى ه دش ث وب ؾ ت ا بیی ا ذتلی م دس تحشیه فشاخ ا ی ه ػیت ب هیگشدد) 32 (. آى ب بى داد ذ و یه فبوت س پیؾ الت بثی دس ػل ل بی ا ذتلیبل اػت. اص آ دب و ثیوبسی تللت ؿشائیي یه ثیوبسی هضهي الت بثی اػت مؾ دس ایي ثیوبسی اص عشیك ؿشع الت بة دس ا ذتلی م اػت و دس بیت ه دش ث افضایؾ ثیبى ه لى ل E-selectin ICAM-1 طى فشاخ ا ذ ؿذى ه ػیت ب ث الی صیشا ذتلی م ایدبد ضبیؼبت پالن بی آتشاػىلشص هیؿ د. ػال ثش ه لى ل بی چؼج ذگی ػل لی چ ى وب ؾ یب ه بس هوىي اػت ه دش ث تغییش ثیبى طى بی ثؼیبسی ؿ د و دس تللت ؿشائیي ا ویت داس ذ. ث ع س هثبل ای تشل ویي 1 ثتب یه فبوت س الت بثی ه ن اػت و دس پیشفت ضبیؼ آتشاػىلشص مؾ ه وی داسد) ث بثشایي وب ؾ ثیبى هیت ا ذ ه دش ث وب ؾ ثیبى ػبیش فبوت س بی الت بثی اصخول ای تشل ویي 1 ثتب گشدد. دسهدو ع هغبلؼ هب بى داد و ثیص ی ه دش ث وب ؾ ثیبى طى هیؿ د. اصآ دب و شدی ایي ه لى ل ب اص فبوت س بی ه ن دس ؿشع پیشفت ثیوبسی الت بثی ػشق اصخول ثیوبسی تللت ؿشائیي فشاخ ا ذ ؿذى فبوت س بی الت بثی ث هحل ضبیؼ اػت ایي احتوبل خ د داسد و ثیص ی تأثیش هثجت دس س ذ ث ج د ثیوبسی تللت ؿشائیي یب حتی خل گیشی اص ایدبد آى داؿت ثبؿذ. هغبلؼ ثیبى ایي طى ب دس ػغح پشتئیي وچ یي ػبیش فبوت س بیی و دس ثیوبسی تللت ؿشائیي خ د داسد دس ػل ل بی ا ذتلیبل دس ؿشایظ

7 561 هوا دادگرنيا و هوكارش ثیص ی ؿجی ػبصی ؿذ همبیؼ آى ثب ؿشایظ ثیص ی الؼی دس فضب وچ یي دس فضب سداى هیت ا ذ اعالػبت ػ ده ذتشی سا دس ایي صهی دس اختیبس هب لشاس د ذ. ث ع س ولی ثیص ی یه هحیظ خذیذ ثشای ا دبم هغبلؼبت صیؼتی پضؿىی ث د هغبلؼ ػل ل ب دس ؿشایظ ثیص ی هیت ا ذ اعالػبت اسصؿو ذی سا دس ه سد ح ایدبد پیشفت ثؼیبسی اص ثیوبس دس اختیبس هحممیي لشاس د ذ پبػخ ثؼیبسی اص ػ االتی سا و دس ػل م خ د داسد هخق ػبصد. سپاسگساری ایي همبل ثش اػبع ثخی اص تبیح حبكل اص پبیبى به دا د ی وبسؿ بػی اسؿذ ط تیه ثب ػ اى ثشسػی تأثیش ؿشایظ فضب ثش سی ثیبى هبسوش بی ػل ل ا ذتلیبل سیذ ث ذ بف ا ؼبى گبسؽ ؿذ اػت و دس ػبل 1394 دس آصهبیگب صیؼت فضبیی پظ گب ا فضب ا دبم ؿذ اػت. یؼ ذگبى همبل هشاتت لذسدا ی خ د سا اص هؼئ لیي هحتشم پظ ی آى هشوض اثشاص References: هیداس ذ. 1- Tabas I, García-Cardeña G, Owens GK. Recent insights into the cellular biology of atherosclerosis. J Cell Biol 2015; 209(1): Spinelli FR, Pecani A, Conti F, Mancini R, Alessandri C, Valesini G. Post-translational modifications in rheumatoid arthritis and atherosclerosis: Focus on citrullination and carbamylation. J Int Med Res 2016; 44(1 suppl): Lawson JS. Multiple Infectious Agents and the Origins of Atherosclerotic Coronary Artery Disease. Front Cardiovasc Med 2016; 3: Gerrity RG. The role of the monocyte in atherogenesis I: transition of blood-borne monocytes into foam cells in fatty lesions. Am J Pathol 1981; 103(2): Faggiotto A, Ross R, Harker L. Studies of hypercholesterolemia in the nonhuman primate. I: changes that lead to fatty streak formation. Arteriosclerosis 1984; 4(4): Davies MJ, Woolf N, Rowles PM, Pepper J. Morphology of the endothelium over atherosclerotic plaques in human coronary arteries. Br Heart J 1988; 60(6): Springer TA, Cybulsky MI. Traffic signals on endothelium for leukocytes in health, inflammation, and atherosclerosis. In: Fuster V, Ross R, Topol EJ, eds. Atherosclerosis and Coronary Artery Disease. Volume 1. Philadelphia, Pa: Lippincott-Raven Publishers; 1996: Alon R, Kassner PD, Carr MW, Finger EB, Hemler ME, Springer TA. The integrin VLA-4 supports tethering and rolling in flow on. J Cell Biol 1995; 128(6): Berlin C, Bargatze RF, Campbell JJ, Von Andrian UH, Szabo MC, Hasslen SR, Nelson RD, Berg EL, Erlandsen SL, Butcher EC. Integrins mediate lymphocyte attachment and rolling under physiologic flow. Cell 1995; 80(3):

8 562 کاهص بياى شىهای و در ضرايط بيوزني: 10- Gerszten RE, Luscinskas FW, Ding HT, Dichek DA, Stoolman LM, Gimbrone MA Jr, Rosenzweig A. Adhesion of memory lymphocytes to vascular cell adhesion molecule-1-transduced human vascular endothelial cells under simulated physiological flow conditions in vitro. Circ Res 1996; 79(6): Konstantopoulos K, Kukreti S, Smith CW, McIntire LV. Endothelial P-selectin and each can function as primary adhesive mechanisms for T cells under conditions of flow. J Leukoc Biol 1997; 61(2): Muller WA, Weigl SA, Deng X, Phillips DM. PECAM-1 is required for transendothelial migration of leukocytes. J Exp Med 1993; 178(2): Bogen S, Pak J, Garifallou M, Deng X, Muller WA. Monoclonal antibody to murine PECAM-1 (CD31) blocks acute inflammation in vivo. J Exp Med 1994; 179(3): Springer TA. Traffic signals for lymphocyte recirculation and leukocyte emigration: the multistep paradigm. Cell 1994; 76(2): Iiyama K, Hajra L, Iiyama M, Li H, Di-Chiara M, Medoff BD, Cybulsky MI. Patterns of vascular cell adhesion molecule-1 and intercellular adhesion molecule-1 expression in rabbit and mouse atherosclerotic lesions and at sites predisposed to lesion formation. Circ Res 1999; 85(2): Porat RM, Grunewald M, Globerman A, Itin A, Barshtein G, Alhonen L, Alitalo K, Keshet E. Specific induction of tie1 promoter by disturbed flow in atherosclerosis-prone vascular niches and flow-obstructing pathologies. Circ Res 2004; 94(3): Chan B, Yuan HT, Ananth Karumanch S, Sukhatme VP. Receptor tyrosine kinase Tie-1 overexpression in endothelial cells upregulates adhesion molecules. Biochem Biophys Res Commun 2008; 371(3): Garcia-Cardena G, Comander j, Anderson KR, Blackman BR, Gimbrone MA. Biomechanical activation of vascular endothelium as a determinant of its functional phenotype. Proc Natl Acad Sci USA 2001; 98(8): McCormick SM, Eskin SG, McIntire LV, Teng CL, Lu CM, Russell CG, Chittur KK. DNA microarray reveals changes in gene expression of shear stressed human umbilical vein endothelial cells. Proc Natl Acad Sci USA 2001; 98(16): Cogoli A. Theories and models of biological response to gravity: an introduction. Adv Space Res 1992; 1(1): Cines DB, Pollak ES, Buck CA, Loscalzo J, Zimmerman GA, McEver RP. Endothelial cells in physiology and in the pathophysiology of vascular disorders. Blood 1998; 91: Liu Q, Zhou RL, Zhao X, Chen XP, Chen SG. Acclimation during space flight: effects on human emotion. Mil Med Res 2016; 3(1): 15.

9 563 هوا دادگرنيا و هوكارش 23- Rea G, Cristofaro F, Pani G, Pascucci B, Ghuge SA, Corsetto PA, Imbriani M, Visai L, Rizzo AM. Microgravity-driven remodeling of the proteome reveals insights into molecular mechanisms and signal networks involved in response to the space flight environment. J Proteomics 2016; 137: Crawford-Young SJ. Effects of microgravity on cell cytoskeleton and embryogenesis. Int J Dev Biol 2006; 50(2-3): Hughes-Fulford M, Lewis ML. Effects of microgravity on osteoblasts growth activation. Exp Cell Res 1996; 224(1): Unsworth BR, Lelkes PI. Growing tissues in microgravity. Nature medicine Aug 1; 4(8): Cines DB, Pollak ES, Buck CA, Loscalzo J, Zimmerman GA, McEver RP. Endothelial cells in physiology and in the pathophysiology of vascular disorders. Blood 1998; 91(10): Nakashima Y, Raines EW, Plump AS, Breslow JL, Ross R. Upregulation of and ICAM-1 at Atherosclerosis-Prone Sites on the Endothelium in the ApoE-Deficient Mouse. Arterioscler Thromb Vasc Biol 1998;18(5): Cybulsky MI, Iiyama K, Li H, Zhu S, Chen M, Iiyama M, Davis V, Gutierrez-Ramos JC, Connelly PW, Milstone DS. A major role for, but not ICAM-1, in early atherosclerosis. J Clin Invest 2001; 107(10): Ramos CL, Huo Y, Jung U, Ghosh S, Manka DR, Sarembock IJ, Ley K. Direct demonstration of P-selectinand VCAM- 1-dependent mononuclear cell rolling in early atherosclerotic lesions of apolipoprotein E-deficient mice. Circ Res 1999; 84(11): Huo, Y, Hafezi-Moghadam, A, Ley K. Role of vascular cell adhesion molecule-1 and fibronectin connecting segment-1 in monocyte rolling and adhesion on early atherosclerotic lesions. Circ Res 2000; 87(2): Chan B, Sukhatme VP. Suppression of Tie-1 in endothelial cells in vitro induces a change in the genome-wide expression profile reflecting an inflammatory Function. FEBS Lett 2009; 583(6): Dinarello CA. Interleukin-1. Cytokine Growth Factor Rev 1997; 8: Von der Thusen JH, Kuiper J, van Berkel TJ, Biessen EA. Interleukins in atherosclerosis: molecular pathways and therapeutic potential. Pharmacol Rev 2003; 55(1): Kirii H, Niwa T, Yamada Y, Wada H, Saito K, Iwakura Y. Lack of interleukin-1beta decreases the severity of atherosclerosis in ApoE-deficient mice. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2003; 23(4): Elhage R, Maret A, Pieraggi MT, Thiers JC, Arnal JF, Bayard F. Differential effects of interleukin-1 receptor antagonist and tumor necrosis factor binding protein on fatty-streak formation in apolipoprotein E- deficient mice. Circulation 1998; 97(3):

10 564 کاهص بياى شىهای و در ضرايط بيوزني: Decrease of and Genes Expression in Microgravity Condition: New Strategy for Study and Treatment of Atherosclerosis Disease Homa Dadgarnia (MSc) 1, Zahra Hajebrahimi (PhD)* 2 1 Department of Biology, Faculty of Basic Science, Azad University of Damghan, Damghan, Iran. 2 Aerospace Research Institute, Ministry of Science Research and Technology, Tehran, Iran. Received: 25 Jan 2016 Accepted: 10 Sep 2016 Abstract Introduction: and are endothelial molecule and receptor, respectively that may participate in atherosclerosis disease. Endothelial cells are very sensitive to mechanical forces, including microgravity and the morphological and functional changes in this condition. To examine the effect of gravity on atherosclerosis disease, we analyzed the expression of and genes in microgravity condition in HUVEC cells. Methods: The research method was experimental. HUVEC cells purchased from Pastor Institute. We used a clinostat to simulate microgravity condition for 2, 24 and 72 hours. Real time PCR technique was used for gene expression analysis after extraction of RNA from cells. Results: Our results showed that microgravity led to a significant decrease in gene expression of and (p<0.05).this response remained similar after 72 hours of exposure to microgravity. Conclusion: It seems that weightlessness has a positive impact on reducing the factors causing atherosclerosis and can be used as a new strategy in the treatment of the atherosclerosis disease. Microgravity also can be used to study development and progression of vascular disease. Keywords: Atherosclerosis; Human Umbilical Vein Endothelial Cell (HUVEC); Microgravity; ; This paper should be cited as: Homa Dadgarnia, Zahra Hajebrahimi. Decrease of tie1 and vcam-1 genes expression in microgravity condition: new strategy for the study and treatment of atherosclerosis disease. J Shahid Sadoughi Univ Med Sci 2016; 24(7): *Corresponding author: Tel: , hajebrahimi@ari.ac.ir